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細(xì)胞污染預(yù)防的種類和方法

更新時間:2024-10-25點(diǎn)擊次數(shù):591
  細(xì)胞污染在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,非常常見。目前為止,防止細(xì)胞污染的首要手段是預(yù)防。細(xì)胞污染通常會出現(xiàn)在生物安全柜和培養(yǎng)箱這兩個地方,因此,如何做好這兩個地方的預(yù)防措施呢?
  一、所有進(jìn)入安全柜的東西都要盡可能保證無菌
  直接購買商用試劑和耗材是穩(wěn)定的方式,如Gibco、中科百抗的血清,Corning的耗材等,這些品牌的試劑和耗材一般只要是正品都可以保證無菌。若自己配制的試劑,那么在配制中需要嚴(yán)格按無菌操作進(jìn)行。
  二、分裝的試劑建議過濾一次
  試劑在分裝時可以考慮再用針頭式過濾器過濾一次,減少污染的可能性。
  三、安全柜每次使用前需要滅菌、換氣
  生物安全柜在每次使用前需要紫外照射30min滅菌,然后通風(fēng)5min以上保證換氣到位。
  四、實(shí)驗(yàn)過程中注意試劑的封蓋問題
  實(shí)驗(yàn)過程中所有試劑不用時需要蓋上瓶蓋,瓶蓋打開時除了干凈的吸頭,其他任何東西都不要從瓶口的上方經(jīng)過。如果使用培養(yǎng)皿培養(yǎng)細(xì)胞,則處理時不要長時間打開皿蓋。
  五、培養(yǎng)皿培養(yǎng)細(xì)胞操作要輕柔
  如果使用培養(yǎng)皿培養(yǎng)細(xì)胞,放入培養(yǎng)箱前搖勻時要輕柔,不要將培養(yǎng)基搖到皿蓋和皿身的間隙中,這樣在細(xì)胞生長時很容易污染。
  六、及時清理污染的細(xì)胞
  晚期污染則是細(xì)胞形態(tài)發(fā)生明顯改變,細(xì)胞停止生長,顯微鏡下可見大量微生物。這時候建議大家及時清理掉相關(guān)細(xì)胞,以免污染其他細(xì)胞。在對安全柜和培養(yǎng)箱進(jìn)行消毒后,再重新復(fù)蘇早批次的細(xì)胞。
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